選對(duì)轉(zhuǎn)染試劑,你真是省了很多事
2022-01-12 836
轉(zhuǎn)染試劑,是一種新型高效的陽離子聚合物。它可以與核酸(包括質(zhì)粒、siRNA、寡聚核苷酸)相互作用形成一種復(fù)合物將核酸轉(zhuǎn)運(yùn)到真核細(xì)胞內(nèi),適用于大部分真核細(xì)胞的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。
盡管很多讀者都曾經(jīng)或者經(jīng)常做細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),然而對(duì)轉(zhuǎn)染的基本科學(xué)原理和實(shí)際應(yīng)用可能也知之甚少。轉(zhuǎn)染的兩個(gè)主要目的是生成重組蛋白,或特異性地增強(qiáng)或抑制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。
因此,轉(zhuǎn)染是一種功能強(qiáng)大的分析工具,可用于基因或基因產(chǎn)物的功能和調(diào)控研究,用于生成轉(zhuǎn)基因生物,并可用作基因治療方法。
特殊設(shè)計(jì)的陽離子脂質(zhì)體,如轉(zhuǎn)染試劑,可促進(jìn)DNA和siRNA進(jìn)入細(xì)胞。陽離子脂質(zhì)體的基本結(jié)構(gòu)包括帶正電荷的頭基和一個(gè)或兩個(gè)碳?xì)滏?。帶電荷的頭基可以調(diào)控脂質(zhì)與核酸的磷酸骨架之間的相互作用,促進(jìn)DNA凝集。
值得一提的是,轉(zhuǎn)染試劑可將DNA、RNA、siRNA或寡核苷酸高效導(dǎo)入各種類型的細(xì)胞內(nèi),試劑利用先進(jìn)的脂質(zhì)納米微粒技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染效率和可重復(fù)的結(jié)果,適用于各種難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型,提高了細(xì)胞活性。
在轉(zhuǎn)染的早期,陽離子脂質(zhì)體通過介導(dǎo)DNA凝集和DNA-細(xì)胞相互作用促進(jìn)了轉(zhuǎn)染。采用陽離子脂質(zhì)體試劑進(jìn)行輸送的原理不同于之前使用中性脂質(zhì)體進(jìn)行轉(zhuǎn)染的原理。
采用陽離子脂質(zhì)體試劑時(shí),DNA溶液并非特意包裹在脂質(zhì)體內(nèi);而是帶負(fù)電荷的DNA與帶正電荷的脂質(zhì)體自發(fā)結(jié)合,形成DNA-陽離子脂質(zhì)體試劑復(fù)合物。